性侵是一种严重的犯罪行为，长期以来，鉴定来源于性侵案的体液是法医调查的一个重要方面。虽然在法医实验室已经成功的进行了精液和唾液的检测，但检测其它体液如阴道分泌液或月经血却比较困难。特别是区分外周血和月经血对警方调查非常重要，因为这可以为案情信息提供潜在证据。本文作者介绍了一种基于免疫层析方法对这类体液斑进行鉴别的试剂盒，即SERATEC PMB Test试剂盒，并介绍了其在实际案件中的应用。

SERATEC PMB Test是一种基于免疫层析技术的分析方法，该试剂盒可以同时检测人类血红蛋白和D-dimer。SERATEC PMB Test是世界上首个用于鉴定法医样品中人类外周血和月经血的商业试剂盒。

在本文中作者对该试剂盒进行了以下研究：（1）通过梯度稀释的外周血和月经血样本验证PMB Test的灵敏度。（2）其它体液以及其它不同物种的血液可能产生的影响以及产生交叉反应的可能性。（3）老年人的血以及尸体血对检测结果的影响。（4）缓冲液中剩余样品进行DNA提取以及PCR扩增的可行性。（5）一个民族工艺品的案例研究。（6）对十宗性侵案件中带血样品的检测。

本研究中使用的月经血样品采集于年龄介于24到39岁的16名健康女性，分别在月经第1,2,3天通过阴道拭子采集月经血。另外通过月经杯采集一份液体月经血。采集的14份外周血分别来自于6名女性和8名男性。因D-dimer含量随着年龄增加而增加，同时采集了5份60岁以上老年人的外周血。

灵敏度验证结果显示400ng/ml的干燥的月经血就可以完全检测出明显的阳性结果。而液体月经血300ng/ml就可以检测出阳性，相当于120nl样品。

为了验证其它体液对试剂盒检测的影响，作者分别用纯的外周血，阴道分泌物，精液，唾液以及尿液和这些体液与月经血的混合物分别做了测试。结果显示所有的体液与月经血的混合物均显示D-dimer阳性，而其它纯体液均显示阴性无假阳性情况。另外作者也测试了狗，猫，绵羊，山羊，马和兔子的血液样本对检测的影响。结果显示除了兔子血外，其它动物血均为阴性。兔子的血D-dimer显示阳性，但外周血显示为阴性，表明样品中并无人类血液存在，结果并不影响用户对结果的解释。

5例老年人的血液测试结果均显示外周血阳性，D-dimer阴性。干燥血的信号强度略强于液体血，但没有D-dimer假阳性存在。因此来源于老年人的血液样品不会对检测产生影响。

来源于10例尸体血液样品均检测到外周血存在，其中有7例样品显示D-dimer阳性。这7例样品中有3例显示弱阳性结果，另外4例显示的信号强度无法被摄像头捕捉。产生这种结果的原因是在垂死的细胞和尸体上会发生各种反应。其中一个可能引起D-dimer显示阳性反应的解释是氧气含量的降低引发了厌氧代谢。这种转化导致了乳酸的积累，从而引起尸体pH值的降低。血浆中pH的降低将会导致纤维蛋白溶解，从而产生D-dimer。

作者对剩余缓冲液中的样品以及检测卡内试纸条分别进行了DNA提取和STR检测。结果显示两者在信号强度上并没有明显差异。这对于实际应用是非常有意义的。缓冲液中的样品的DNA检测避免了样品的损失；而检测卡内试纸条的DNA检测在样品量较少，所有样品都需要用来分析时就非常重要。

作者进行了一项涉及一尊非洲雕塑的案例研究，这个雕塑在加蓬的一个农村部落用于传统的医疗和司法审判仪式。这尊雕塑年代不详，用木头雕成，被怀疑上面涂满了人类血液或月经血。作者用棉签擦拭该雕塑，然后用SERATEC Test进行检测。结果显示样品中存在人类外周血，但D-dimer为阴性。同时作者用RSID-Blood Test进行确认，检测出了血型糖蛋白A。表明这个雕塑中含有人类外周血，但不含有月经血。这项研究得到的结果明确，确认了SERATEC Test可以应用于法医领域。

十宗性侵案件样品的研究，其中有4例样品是在月经3天内取得的检材，D-dimer均显示阳性结果。另外有4例样品距末次月经8天以上，检测结果D-dimer均为阴性，外周血均为阳性。1例样品检测不含人血。另外1例样品距末次月经10天，但检测D-dimer阳性，可能是因为上次月经血残留在阴道中。

通过以上研究成果，作者认为SERATEC PMB Test可以用来检测样品中是否含有人类外周血或者月经血。这个试剂盒简单易用，结果解释非常直观和明确。不需要进行特殊的培训就可以上手使用。

SERATEC PMB Test试剂盒是世界上首个利用免疫层析技术在同一个检测卡上同时检测两种体液的商业试剂盒。同时还可以从剩余的缓冲液样品中同时进行相关DNA检测，确保了体液斑的损失最小，这对于微量样品来说是非常重要的。

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Holtk-tter_et_al-2017-International_Journal_of_Legal_Medicine(1).pdf

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