COPAN法医和遗传学植绒拭子可以对DNA进行长期保存
结论
COPAN遗传学4N6FLOQSwabs植绒拭子适用于口腔DNA的室温长期保存(长达6个月)。
COPAN法医学4N6FLOQSwabs植绒拭子适用于现场刑事勘察的微量DNA的室温长期保存(长达6个月)。
能够获得完整的STR图谱。
背景
样本采集工具对于刑事勘察的生物样本采集、保存和分析是非常重要的。COPAN生产两种植绒拭子(4N6FLOQSwabs)产品线:遗传学植绒拭子用于口腔样本采集和法医学植绒拭子用于现场物证的采集。4N6FLOQSwabs遗传学和法医植绒拭子经过认证不含人员DNA,不含DNA酶和RNA酶。
目的
本研究的目的是评估4N6FLOQSwabs(遗传学和法医学)植绒拭子采集的样本:
1. 室温长时间保存(6个月)
2. STR图谱分析核酸稳定性
材料
本研究对4N6FLOQSwabs两种植绒拭子都进行了测试。
测试了不同类型的遗传学拭子:
易撕袋型
长塑料管型
平短管型
有主动干燥系统的短管型,用于采集后拭子干燥无需风干
法医学4N6FLOQSwabs植绒拭子使用抗菌试剂处理,可以抑制细菌增殖,无需保存前干燥拭子。这些拭子有规则形状以及各种不同的形状,用于特定位置样本采集,以及袋装,长管和短管包装。
方法
(1) 使用遗传学4N6FLOQSwabs植绒拭子采集13个个体的口腔样本。
按照COPAN的口腔样本指南进行采集。
植绒拭子放回包装管前,先干燥一小时。
一组拭子采集后0时进行检验,作为基准;一组保存在室温;另一组在-80℃保存6个月。
保存时间结束,使用Prep Filer Express试剂盒在Automate Express上提取DNA,使用Quantifier Trio进行定量,Identifier Plus试剂盒进行STR扩增(28个PCR循环),3130测序仪电泳分析。
(2) 法医4N6FLOQSwabs植绒拭子滴加人血(2个个体),唾液(2个个体)或者Quantifier Human试剂盒中的标准DNA。
每个样本每个测试时间用10ng DNA/拭子(稀释1,产生完整STR图谱)和1ng DNA/拭子(稀释2,完整但低信号STR图谱)进行平行测试。
一组样本0时检测作为基准,一组保存在常温,一组在-80℃保存3个月和6个月。
0时样本,每个保存时间和条件的样本使用Prep Filer Express试剂盒在Automate Express上提取DNA,使用Quantifier Trio进行定量,Identifier Plus试剂盒进行STR扩增(28个PCR循环),3130测序仪电泳分析。
结果
与0时样本相比,使用COPAN遗传学植绒拭子采集的口腔样本在室温和-80℃保存6个月后,100%可以获得完整的STR图谱。
与0时样本相比,使用COPAN法医学植绒拭子滴加的少量唾液、血和标准DNA样本在室温和-80℃保存3个月和6个月100%获得完整STR图谱。
COPAN的遗传学和法医学植绒拭子使用Quantifier Trio试剂盒,在不同的保存时间和保存条件下都没有检测到DNA降解(降解系数<1)。
口腔拭子:Quantifier Trio人类DNA降解系数(如果≤1无降解)
口腔拭子:平均STR峰高(W/O稀释)
口腔拭子STR图谱示例
-80℃保存6个月
室温保存6个月:
法医学拭子稀释1:Quantifier Trio人类DNA降解系数(如果≤1无降解):
法医学拭子稀释2:Quantifier Trio人类DNA降解系数(如果≤1无降解):
法医学拭子稀释1:平均STR峰高:
法医学拭子稀释2:平均STR峰高:
法医学植绒拭子STR图谱示例:
结论
COPAN遗传学4N6FLOQSwabs植绒拭子适用于口腔DNA的室温长期保存(长达6个月)。
COPAN法医学4N6FLOQSwabs植绒拭子适用于现场刑事勘察的微量DNA的室温长期保存(长达6个月)。
能够获得完整的STR图谱。
12个月保存稳定实验正在进行。